11月24日,中国农业科学院作物科学研究所作物精准育种技术创新团队联合华中农业大学水稻团队开发了“转基因自清除介导的错配靶向鸡尾酒策略”,攻克了水稻等作物“必需基因”因功能缺失导致突变体无法传代的问题,为系统解析这类关键基因功能及育种应用提供了重要工具。相关研究成果发表在《植物生物技术(Plant Biotechnology Journal)》上。

当前基因敲除技术普遍追求高编辑效率,导致水稻等作物生存或繁衍的“必需基因”在编辑当代就产生高比例的完全缺失突变,因其功能缺失会造成植株死亡或不育,进而导致无法稳定传代,制约了对该类基因功能的解析与利用。
研究团队基于此前开发的“转基因自清除”基因编辑系统,通过将携带与靶基因完全匹配、单碱基错配、双碱基错配三种不同的基因编辑载体等比例混合,组成基因编辑载体的“鸡尾酒”型混合物,共同转化水稻。该策略既能利用完全匹配的载体保证基础编辑效率,又能利用错配载体提升不完全编辑突变体的比例,并利用转基因自清除机制在后代中自动移除编辑组件,从而稳定遗传目标突变。该策略通用简便,无需预先了解靶点特性,能将可遗传非纯合突变体的获得效率提升至11%-20%,是传统方法的6倍以上。该研究为构建水稻全基因组突变体库、解析“必需基因”的功能提供了技术支撑。
华中农大已毕业博士生徐美莲为论文第一作者,作科所和玉兵副研究员为论文通讯作者。该研究得到农业生物育种重大专项、国家自然科学基金、中国农业科学院青年创新专项、中国农业科学院南繁专项等项目的资助。
文章链接:http://doi.org/10.1111/pbi.70472